February 7, 2010

Kloning Gen Protein Kapsid Human Papiloma Virus (L1HPV) : Studi Awal Pengembangan Kandidat Vaksin Murah Untuk Pencegahan Penyakit Kanker Serviks

Edhyana Sahiratmadja, dr., Ph.D Octavia Ramayanti, S.Si., M.Biomed

Fakultas: KEDOKTERAN Sumberdana: Strategis Nasional Unpad Tahun: 2010

Abstrak: Kanker serviks yang disebabkan oleh infeksi Human Papiloma Virus (HPV) merupakan kesehatan perempuan yang perlu mendapatkan perhatian serius. Kanker serviks mengenai sekitar 150.000 kasus baru di dunia tiap tahunnya. Jenis infeksi HPV pada serviks banyak ditimbulkan oleh HPV tipe 16. Protein penyelubung pada virus (L1) diduga bertanggung jawab sebagai bagian dari virus yang menyerang epitel serviks. Pemberian vaksin propilaksis pada populasi perempuan dengan risiko tinggi merupakan salah satu upaya untuk mencegah peningkatan kasus penyakit pra-kanker dan kanker serviks. Pengetahuan mengenai sekwens gen L1 dapat memberikan informasi yang berguna bagi pengembangan vaksin. Tujuan dari penelitian kami adalah untuk mengklon dan mencari sekwens L1 dari HPV 16 dari isolat klinik asal Bandung, sebagai bagian dari survey prevalensi di Bandung. Penelitian dilakukan dengan cara kloning dan karakterisasi gen L1 dari HPV tipe 16 dan 18 dari isolat klinik asal Bandung. Secara ringkas, DNA virus diekstraksikan dari biopsi bahan pasien yang menderita kanker serviks yang diambil dari Bagian Kebidanan RS. Hasan Sadikin/FK Universitas Padjadjaran. Gen L1 HPV 16 diamplifikasi dengan cara Polymerase Chain Reaction (PCR) dengan menggunakan primer spesifik. Fragmen L1 kemudian diklon, dan diinsersikan ke dalam pJET1.2/L1-16 yang kemudian dipotong dengan enzim BamHI and BgIII. Konstruk kemudian diverifikasi dengan cara sekuensing. HPV-16 L1 DNA yang utuh sebesar 1595 pasang basa dapat diamplifikasi dari sediaan biopsi. Analisa dari sekuensing gen L1 HPV 16 dari isolat klinik asal Bandung menujukkan kesamaan homologi (99%) dengan L1 HPV 16 yang terregistrasi pada GenBank (acc number: FJ610150.1). Demikian pula dengan analisa dari translasi sekwens dari rekombinan L1 HPV-16 dari Bandung ini menunjukkan kesamaan homologi (97%) dengan protein L1 HPV- 16 (GenBank Acc number: AAV91659). Pada penelitian ini rekombinan kloning vektor gen L1 HPV-16 dari Bandung dapat diiklon dengan baik dan terkonfirmasi. Kata kunci: : kanker serviks, Human Papilloma Virus, L1 HPV-16

Artikel terkait